環(huán)氧乙烷滅菌生物指示劑的芽孢計數(shù)方法。（1）芽孢洗脫。在生物安全柜中，取4片（支）生物指示劑打開，取出載體，分別放置于含有3-4顆玻璃珠（直徑6mm）的無菌試管中，向無菌試管中加入3mL的含，置于渦旋混勻儀上充分振蕩，將試管中載體打散成纖維裝后，再中加入7mL含，震蕩30s，制成均一的菌懸液，將該試管記為10-1。（2）熱激活。將水浴鍋加熱至80℃-85℃，取上述試管，放置于水浴鍋中熱激活10min，熱激完成后，立即將芽孢懸液轉(zhuǎn)移至0-4℃的冰水浴中冷卻至室溫。（3）梯度稀釋。將該試管轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，于旋渦混勻儀上旋渦30s，用移液槍吸取1mL芽孢懸液，加入到另一根含有9mL含，記為10-2，按照該方法依次稀釋至10-3、10-4（稀釋級別按制造商提供的芽孢數(shù)量而定）。（4）制備計數(shù)平皿。取芽孢數(shù)在30cfu/mL-300cfu/mL的稀釋級別的試管（10-4）震蕩30s，每支稀釋管平行制備2個平皿，每皿加1mL菌懸液，注入15mL-20mL溫度不超過45℃融化的胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基（TSA）。等待瓊脂凝固后，倒置于30℃-35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h-72h后計數(shù)。 泰林對生物指示劑的培養(yǎng)條件進行了科學(xué)優(yōu)化，能有效減少假陰性和假陽性結(jié)果。北京蒸汽滅菌生物指示劑

    泰林壓力蒸汽滅菌生物指示劑芽孢計數(shù)的注意事項。（1）切勿將生物指示劑進行紫外照射消毒，建議對初級包裝進行擦拭。（2）應(yīng)按2020年版《中國藥典》要求，選擇無菌水作為稀釋液。（3）吸取含紙質(zhì)載體的菌液時，避免纖維堵槍頭，導(dǎo)致移液不準(zhǔn)確。（4）建議以單片（支）生物指示劑的形式進行計數(shù)，確保每片（支）生物指示劑計數(shù)結(jié)果均符合要求。（5）建議使用玻璃珠（4mm~6mm）對紙質(zhì)載體進行打散處理。（6）芽孢計數(shù)過程中必須進行熱激活處理：溫度95℃~100℃，時間15min。 滅菌鍋生物指示劑操作流程壓力蒸汽滅菌生物指示劑的原理是利用高溫和高壓蒸汽使微生物的蛋白質(zhì)變性、酶失活。

    生物指示劑培養(yǎng)是滅菌驗證的重要步驟，其結(jié)果直接反映滅菌工藝的有效性。該過程通過培養(yǎng)滅菌后的生物指示劑，檢測是否有微生物存活，以此驗證滅菌過程是否達(dá)到無菌保證水平（SAL10??）。其關(guān)鍵機制在于：滅菌后，若芽孢未被完全殺滅，殘留微生物在適宜的溫度和營養(yǎng)條件下會復(fù)蘇生長，導(dǎo)致培養(yǎng)基變色（如溴甲酚紫變黃）；若滅菌成功，芽孢全部死亡，則培養(yǎng)基顏色保持不變，呈現(xiàn)陰性結(jié)果。這一過程為滅菌效果提供了直觀且可靠的判斷依據(jù)。

    懸液式濕熱滅菌生物指示劑的定義：將芽孢和顯色培養(yǎng)基共同封裝在玻璃管中的生物指示劑，是一種特殊的自含式生物指示劑。懸液式生物指示劑在滅菌程序結(jié)束后可直接培養(yǎng)，操作便利，降低污染可能性，減少甚至杜絕出現(xiàn)假陰和假陽的情況。懸液式濕熱滅菌生物指示劑一般適用于壓力蒸汽滅菌驗證中的液體滅菌效果監(jiān)控，使用時需要將生物指示劑放入液體中一起滅菌。泰林生物提供安瓿管式和直管式的懸液式濕熱滅菌生物指示劑，使用時無需接種，直接培養(yǎng)觀察結(jié)果，紫色為陰性，黃色為陽性。直管式體積更小巧，適合特定的管道（醫(yī)療器械）等材料滅菌效果的監(jiān)測。 濕熱滅菌參數(shù)達(dá)標(biāo)≠成功！泰林生物驗證才是關(guān)鍵保障。

    過氧化氫滅菌生物指示劑的質(zhì)量波動控制方法。在進行過氧化氫滅菌驗證的過程中，偶爾會出現(xiàn)滅菌過程無異常，但是個別點位的生物指示劑卻呈現(xiàn)陽性結(jié)果的現(xiàn)象。這是因為生物指示劑質(zhì)量波動或其他未知因素導(dǎo)致的，美國注射劑協(xié)會(ParenteralDrugAssociation，PDA)第51號技術(shù)報告《氣體和汽相除污工藝生物指示劑:質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、生產(chǎn)、控制和使用》將這種難以殺滅的指示劑稱為"RogueBls”，即“流氓生物指示劑”。制造商可以通過提高工藝水平來避免這一現(xiàn)象的發(fā)生，例如針對針對初級包裝、載體、芽孢分布等因素對生物指示劑質(zhì)量進行嚴(yán)格把控。 泰林汽化過氧化氫滅菌生物指示劑，常用于制藥、醫(yī)院、疾控等需要嚴(yán)格消殺的場景。食品工業(yè)生物指示劑FDA要求

自含式壓力蒸汽滅菌生物指示劑重要指標(biāo)：抗性（D值）和培養(yǎng)耐受性。泰林自研防蒸發(fā)結(jié)構(gòu)，有效提升耐受性。北京蒸汽滅菌生物指示劑

    片狀和自含式過氧化氫滅菌驗證用的生物指示劑該如何選擇呢？（1）選擇結(jié)構(gòu)。常壓過氧化氫空間滅菌生物指示劑多為片式，自含式產(chǎn)品目前只有少數(shù)企業(yè)能生產(chǎn)。自含式常壓過氧化氫空間滅菌生物指示劑的載體一般緊靠透氣材料，保證芽孢與過氧化氫充分接觸。真空滅菌生物指示劑產(chǎn)品形式一般為自含式，其染菌載體需遠(yuǎn)離透氣材料（通常在底部），增加滅菌的挑戰(zhàn)性。（2）選擇材料。兩種滅菌方式的生物指示劑均要求兼容滅菌過程，不得影響指示微生物的生長，不得對過氧化氫有吸附效果，如泰林生物指示劑采用不銹鋼材質(zhì)，相較于纖維素材質(zhì)——吸附過氧化氫可能導(dǎo)致假陰性——更加兼容滅菌過程且不吸附過氧化氫，為滅菌驗證提供更加可靠的結(jié)果。（3）菌種選擇。USP、ChP中汽化過氧化氫滅菌生物指示劑的指示微生物均可以是嗜熱脂肪地芽孢桿菌、生孢梭菌以及萎縮芽孢桿菌，市售產(chǎn)品主要采用嗜熱脂肪地芽孢桿菌（ATCC12980）作為指示微生物。真空滅菌生物指示劑的參考標(biāo)準(zhǔn)為GB27955，其中收載嗜熱脂肪地芽孢桿菌ATCC7953作為指示微生物。 北京蒸汽滅菌生物指示劑

   浙江泰林生物技術(shù)股份有限公司（泰林生物SZ：300813）是一家有著先進的發(fā)展理念，先進的管理經(jīng)驗，在發(fā)展過程中不斷完善自己，要求自己，不斷創(chuàng)新，時刻準(zhǔn)備著迎接更多挑戰(zhàn)的活力公司。泰林不僅深受客戶信賴，也在業(yè)界也收獲了很多良好的評價。三十年來，泰林始終堅持在發(fā)展自身經(jīng)濟效益的同時，秉持公益奉獻(xiàn)、利國利民之心，服務(wù)社會、回饋社會，關(guān)注社會公益，踐行社會責(zé)任。例如在2014年杭州公交車爆燃事件中，有15人90%面積燒傷。泰林生物提供過氧化氫滅菌消毒器（環(huán)境消殺儀器）對普通病房進行消毒，以達(dá)到ICU病房級別，為病人創(chuàng)造了高概率無菌生存環(huán)境。